As crossmatch são uma série de estudos laboratoriais realizados para determinar se os produtos sanguíneos de um doador (principalmente sangue total e concentrados de células sanguíneas) são compatíveis com o sangue do receptor.
É um teste complementar de compatibilidade ABO e fator Rh. A razão para a prova cruzada é que às vezes dois indivíduos (doador-receptor) podem ter o mesmo grupo ABO e Rh, mas seu sangue ainda é incompatível..
Essa incompatibilidade se deve à presença de anticorpos contra uma série de proteínas dos glóbulos vermelhos conhecidas como antígenos menores. Esses antígenos não são testados rotineiramente, pois são para grupo sanguíneo (ABO) e fator Rh.
Isso porque os antígenos menores são muito menos frequentes e têm expressão variável em cada indivíduo, portanto é praticamente impossível agrupá-los em categorias como se faz com o grupo e o fator Rh..
Em vez disso, os glóbulos vermelhos do doador são misturados com o soro do paciente (teste de correspondência principal) e os glóbulos vermelhos do paciente com o soro do doador (teste de correspondência menor) para detectar a presença de reações antígeno-anticorpo..
Quando há anticorpos contra antígenos menores, no soro do paciente ou do doador, o teste é considerado positivo, portanto, na maioria dos casos, essa unidade de sangue em particular não pode ser transfundida.
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Para entender completamente o que são reações cruzadas, primeiro você precisa saber o básico sobre grupos sanguíneos..
Nesse sentido, o mais importante é saber que o sangue pode ser classificado em quatro grupos: A, B, AB e O.
Cada um desses grupos expressa uma determinada proteína (antígeno) na superfície dos glóbulos vermelhos, que é identificada como um elemento estranho pelos anticorpos de um receptor potencial de um grupo diferente..
A coisa mais surpreendente sobre as reações antígeno-anticorpo na correspondência sanguínea é que nenhuma exposição prévia ao antígeno é necessária para que os anticorpos existam. Isso é conhecido como anticorpos naturais..
Geralmente, para que haja anticorpos no corpo de um indivíduo, é necessário que os glóbulos brancos do mesmo tenham sido previamente expostos ao antígeno..
Isso significa que no primeiro contato entre o antígeno estranho e o organismo não há anticorpos, pois estes são gerados posteriormente, após o contato inicial. Portanto, é impossível para o sistema imunológico ter anticorpos contra, por exemplo, um determinado vírus, se não tiver sido exposto a ele no passado..
A única exceção ao acima são os antígenos anti-AB. Nesses casos, a pessoa tem anticorpos contra o antígeno que seus glóbulos vermelhos não possuem, embora nunca tenham entrado em contato com os glóbulos vermelhos de outra pessoa. Isso é conhecido como anticorpos naturais..
Os grupos sanguíneos são determinados, no caso do sistema ABO, pela presença de antígenos específicos (A ou B) na membrana dos glóbulos vermelhos e, em contraste, anticorpos contra o antígeno ausente na membrana dos eritrócitos..
Assim, uma pessoa com grupo sanguíneo A expressa o antígeno A na superfície de seus glóbulos vermelhos, enquanto há anticorpos anti-B no soro..
Pelo contrário, em pacientes do grupo B, o antígeno B é encontrado enquanto os anticorpos são anti-A.
Agora, os pacientes com sangue AB têm antígenos A e B. Portanto, não há anticorpos, pois isso destruiria os glóbulos vermelhos dessa pessoa..
Ao contrário, ocorre no grupo O, onde a membrana do eritrócito não apresenta nenhum dos dois antígenos (nem A nem B), enquanto no soro há anticorpos anti-A e anti-B.
Do exposto, a compatibilidade dos grupos sanguíneos ABO pode ser facilmente deduzida, uma vez que conhecer o antígeno da membrana do eritrócito automaticamente conhece os anticorpos no soro. Assim pois:
- O sangue A é compatível com o grupo A e o grupo O.
- O grupo sanguíneo B é compatível com o sangue B e O.
- Pessoas com o grupo O só podem receber sangue O (uma vez que têm anticorpos anti-A e anti-B), embora seu sangue seja recebido por todos os outros grupos sem problemas, pois falta antígenos.
- Finalmente. aqueles com grupo sanguíneo AB podem receber sangue de todos os outros grupos (A, B, O e claro AB), uma vez que não possuem anticorpos contra nenhum dos antígenos. No entanto, apenas as pessoas do grupo AB podem receber sangue AB, pois todos os outros grupos têm anticorpos que destroem esses glóbulos vermelhos..
Tal como acontece com os grupos ABO, uma série de proteínas pode ser encontrada na superfície dos eritrócitos que funcionam como antígenos da mesma forma que os antígenos do grupo ABO..
No entanto, esses antígenos não estão presentes em todos os indivíduos. Sua combinação é heterogênea e a penetrância (nível de expressão da proteína) é variável, portanto, uma classificação em grupos como o que existe para ABO e Rh é impossível. Por isso, seu nome deriva de "antígenos menores", também conhecidos como "antígenos de baixa incidência".
Embora não sejam frequentes, podem haver anticorpos naturais contra antígenos menores. Entre eles, os mais comuns são Lewis, MNSs, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb e Kidd. Todos eles responsáveis por reações hemolíticas e pós-transfusionais muito graves.
Além disso, pode haver o caso de sensibilização contra antígenos menores por contato prévio, seja com as referidas proteínas antigênicas devido a transfusões anteriores ou devido a imunidade cruzada..
Diz-se que existe imunidade cruzada quando dois antígenos de duas fontes diferentes (por exemplo, um glóbulo vermelho e uma bactéria) são muito semelhantes, a ponto de os anticorpos contra uma dessas proteínas antigênicas também reagirem com a outra porque são quase idêntico.
Para entender melhor, pegue o exemplo hipotético anterior (antígenos de um glóbulo vermelho e uma bactéria). Em nenhum dos casos existem anticorpos naturais, mas se uma pessoa for exposta à bactéria, eles irão gerar anticorpos contra ela..
Esses anticorpos reagirão mais tarde contra um glóbulo vermelho se seus antígenos forem muito semelhantes aos da bactéria que induziu a formação dos anticorpos..
Se isso acontecer, os glóbulos vermelhos com aquela proteína antigênica específica não podem ser administrados à pessoa que tem os anticorpos, pois haveria rejeição. Aqui reside a importância das reações cruzadas.
Como é impossível agrupar o sangue de diferentes indivíduos com base nos antígenos menores, a única maneira de saber se existem anticorpos contra os antígenos menores das hemácias de outra pessoa no sangue de uma pessoa é por meio de prova cruzada..
Nos casos em que os anticorpos estão presentes, uma reação de hemólise ou aglutinação é desencadeada, razão pela qual se conclui que a reação foi positiva; ou seja, existem anticorpos contra antígenos menores (embora não se saiba exatamente qual). Caso contrário, o teste é negativo.
As combinações cruzadas são baseadas na reação antígeno-anticorpo. Portanto, com eles é possível detectar se existem anticorpos no soro de um receptor contra os antígenos das hemácias do doador (ou vice-versa), induzindo uma reação antígeno-anticorpo..
Se não houver anticorpos, não ocorre reação e o teste é considerado negativo. Pelo contrário, se a reação for positiva (há hemólise ou aglutinação durante o teste) pode-se concluir que os anticorpos estão presentes.
Nesse sentido, é importante observar que podem existir anticorpos contra hemácias tanto no soro do doador quanto no receptor. É por isso que existem dois tipos de reações cruzadas.
Anticorpos para eritrócitos de doadores podem existir no soro do paciente; mas o oposto também pode ocorrer, ou seja, anticorpos no soro do doador contra os glóbulos vermelhos do paciente.
É por isso que existem dois tipos de crossmatch:
- Crossmatch principal.
- Crossmatch menor.
Ambos os tipos são realizados rotineiramente no banco de sangue antes da transfusão de hemoderivados, pois se algum dos testes der positivo, há alto risco de reações transfusionais que podem colocar em risco a vida do paciente.
Este teste avalia se o soro do receptor contém anticorpos contra os glóbulos vermelhos do doador..
Se isso ocorrer, os hemoderivados não poderão ser administrados, pois uma grande quantidade de anticorpos presentes no plasma do paciente destruirá os glóbulos vermelhos do doador muito rapidamente, gerando reações catastróficas no corpo do receptor no processo. Estas reações são tão graves que podem ser fatais..
Nesse caso, é determinado se há anticorpos contra os glóbulos vermelhos do receptor no soro do doador..
Nesse caso, os anticorpos começarão a destruir os eritrócitos do receptor. Porém, como a quantidade de anticorpos é limitada, a reação é menos intensa; embora ainda seja perigoso.
Tanto o crossmatch principal quanto o secundário são divididos em três fases:
- Salina.
- Térmica ou incubação.
- Coombs.
Na primeira fase, os glóbulos vermelhos e o soro são misturados em solução salina. Em seguida, adiciona-se albumina e a amostra é incubada a 37ºC por 30 minutos para finalmente prosseguir com a fase de coombs..
A técnica de teste cruzado é relativamente simples, pois envolve a adição de glóbulos vermelhos do doador ao soro do paciente (teste cruzado principal), bem como eritrócitos do receptor ao soro do doador (teste cruzado menor)..
Para induzir a reação antígeno-anticorpo em um tempo relativamente curto, uma série de etapas padronizadas deve ser seguida. Essas etapas são resumidas de forma simplificada a seguir.
É importante observar que a seção a seguir descreve o teste de compatibilidade principal, embora as etapas sejam as mesmas para o teste de compatibilidade menor, mas trocando a origem dos glóbulos vermelhos e do soro..
- Adicione a um tubo de ensaio 2 gotas de soro do receptor (do doador se for a prova cruzada menor).
- Retire uma amostra de glóbulos vermelhos do doador (do receptor, se for a prova cruzada menor).
- Lave e centrifugue os glóbulos vermelhos.
- Ressuspender em uma solução de 3% a 5%.
- Coloque uma gota desta solução no tubo contendo o soro do receptor. .
- Misture delicadamente.
- Centrífuga.
- Leia o resultado na lâmpada do display.
- Adicione 2 gotas de albumina a 22% ao tubo onde a fase salina foi concluída.
- Incubar a 37ºC por 30 minutos.
- Centrifugue por 15 segundos.
- Leia o resultado na lâmpada do display.
- Retire as células do tubo e lave-as com solução salina..
- Remova o sobrenadante.
- Adicione duas gotas de reagente de Coombs.
- Misture delicadamente.
- Centrifugue por 15 a 30 segundos.
- Ressuspenda as células e avalie na lâmpada de visualização para aglutinação ou hemólise.
Se houver aglutinação ou hemólise em alguma das fases, o resultado é considerado positivo..
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