O Reação de Fehling O teste de Fehling é um método que permite detectar e, em certa medida, quantificar os açúcares redutores de uma amostra. Suas propriedades químicas são muito semelhantes às da reação de Benedict, diferindo apenas no complexo de cobre que participa da oxidação dos açúcares..
O teste de Fehling também é usado para distinguir entre um aldeído e uma cetona; no entanto, as alfa-hidroxicetonas dão uma resposta positiva, como é o caso dos monossacarídeos cetoses. Assim, as aldoses (monossacarídeos aldeídos) e as cetoses, constituindo os açúcares redutores, são oxidadas às suas respectivas formas ácidas..
A imagem acima mostra o reagente de Fehling no tubo de ensaio à esquerda. Sua cor azulada é devida ao CuSO45hdoisOu dissolvido em água, cujos íons de cobre complexam com ânions tartarato, evitando que o hidróxido de cobre precipite em meio alcalino..
Decorrida a reação em banho quente a 60 ºC e na presença de aldeídos ou açúcares redutores, forma-se um precipitado marrom, indicativo de teste positivo..
Este precipitado é óxido cuproso, CudoisOu, que pode ser pesado para determinar quantos açúcares redutores ou aldeídos estavam na amostra.
Índice do artigo
O reagente de Fehling consiste, na verdade, em uma mistura de duas soluções, A e B, nas quais o complexo bistartratocuprato (II) é formado; este é o verdadeiro agente ativo.
A solução A de Fehling é uma solução aquosa de CuSO45hdoisOu, ao qual uma pequena quantidade de ácido sulfúrico pode ser adicionada para ajudar a dissolver os cristais azulados. Dependendo dos volumes necessários, 7 g ou 34,65 g do sal de cobre são dissolvidos, transferidos para um balão volumétrico de 100 mL ou 400 mL, respectivamente, e completados até a marca com água destilada..
Esta solução é de cor azul claro e contém íons de cobredois+, qual será a espécie reduzida quando a reação de Fehling ocorrer.
A solução B de Fehling é uma solução fortemente alcalina de tartarato de sódio e potássio, também conhecido como sal de La Rochelle, em hidróxido de sódio.
A fórmula para este sal é KNaC4H4OU64hdoisOu, ser capaz de escrever como HOdoisCCH (OH) CH (OH) COdoisH, e 35 g dele são dissolvidos em 12 g de NaOH perfazendo 100 mL de água destilada. Ou se houver mais sal de La Rochelle à disposição, pese 173 ge dissolva em 400 mL de água destilada com 125 g de NaOH, perfazendo 500 mL com água destilada..
O objetivo do meio fortemente alcalino é desprotonar os grupos hidroxila centrais OH do tartarato, de modo que seus átomos de oxigênio possam coordenar com o Cudois+ e estabelecimento do complexo bistartratocuprato (II). Este complexo azul mais escuro é formado quando volumes iguais de soluções A e B são misturados..
Feito isso, uma alíquota de 2 mL é retirada e transferida para um tubo de ensaio, ao qual serão adicionadas 3 gotas da amostra que queremos saber se contém um aldeído ou açúcar redutor. Em seguida e por último, o tubo de ensaio devidamente apoiado é colocado em banho-maria a 60 ºC, aguardando-se o aparecimento de um precipitado marrom indicativo de teste positivo..
Na imagem superior temos a fórmula estrutural do complexo bistartratocuprato (II). Cada íon Cudois+ a solução A forma um complexo com dois tartaratos da solução B, evitando que o hidróxido de cobre precipite devido à presença de íons OH- do Médio.
Este complexo pode ser escrito como Cu (C4H4OU6)dois2−. Por que a carga negativa mudou de -6 para -2? Isso ocorre porque os íons K circundantes não são considerados na imagem.+ garotinha+, que neutralizam as cargas negativas dos grupos carboxilato, -COdois-, das extremidades do complexo.
Assim, Cu (C4H4OU6)dois6− envolvendo-se com dois pares de K+ e Na+, sua carga permanece como Cu (C4H4OU6)dois2−, onde no centro do complexo temos Cudois+.
Qual é a reação que ocorre quando esse complexo entra em contato com um aldeído, uma aldose ou uma cetose? Cetoses em sua conformação cíclica, seu carbono anomérico C-OH é oxidado a CHO: uma aldose, que então continua a oxidar em sua forma ácida, COOH.
A seguinte equação química mostra a oxidação de aldeídos em ácidos carboxílicos:
RCHO + 2 Cu (C4H4OU6)dois2− + 5 OH- → RCOO- + CudoisO + 4 C4H4OU62− + 3 HdoisOU
Mas, como o meio é fortemente alcalino, temos RCOO- e não RCOOH.
O aldeído, aldose ou cetose oxidado, RCHO, é oxidado à medida que adquire uma ligação extra com o oxigênio. Por outro lado, íons Cudois+ são reduzidos a Cu+ (Cudois+OUdois-), a espécie sendo reduzida. À medida que o complexo reage e forma o precipitado vermelho de CudoisOu, os íons tartarato são liberados e livres no meio.
Quando se suspeita de um aldeído ou cetona, um teste de reagente de Fehling positivo indica que se trata de um aldeído. Isso geralmente é muito útil em testes qualitativos orgânicos. Qualquer aldeído, desde que seja alifático e não aromático, reagirá e veremos o precipitado vermelho de CudoisOU.
A reação de Fehling permite quantificar a quantidade de açúcares redutores na amostra pela pesagem de CudoisO. No entanto, não é útil distinguir entre uma aldose ou cetosa, uma vez que ambas dão resultados positivos. A sacarose é um dos poucos açúcares que dá um resultado negativo, a solução permanece azulada.
Glicose, frutose, maltose, galactose, lactose e celobiose, sendo açúcares redutores, respondem positivamente ao reagente de Fehling; e, portanto, graças a este método eles podem ser detectados e quantificados. Por exemplo, a quantidade de glicose no sangue e na urina foi quantificada usando o reagente de Fehling..
Ainda sem comentários